小籃子法（廣口瓶法）測定植物的呼吸速率

實驗概要

呼吸速率指在一定溫度下，單位重量的活細胞(組織)在單位時間內吸收氧或釋放二氧化碳的量，通常以“mg(μl)/(h·g)”為單位，表示每克活組織(鮮重、干重、含氮量等)在每小時內消耗氧或釋放二氧化碳的毫克數。呼吸速率的大小可反映某生物體代謝活動的強弱。

本實驗測定植物進行呼吸時放出CO₂的量，計算一定的植物樣品在單位時間內放出CO₂的數量，即為該樣品的呼吸速率。呼吸放出的CO₂可用氫氧化鋇溶液吸收，實驗結束后用已知濃度的草酸溶液滴定剩余的堿液，從空白和樣品二者消耗草酸溶液之差即可計算出呼吸過程中釋放的CO₂的量。

主要試劑

1. 0.05mol/L 左右的Ba（OH）₂：稱取Ba（OH）₂ 8.6g溶于1000ml蒸餾水中

2. 1／44mol/L 草酸溶液：準確稱取重結晶的H₂C₂O₄^.2H₂O 2.8651g溶于蒸餾水中定容至1000ml，每ml相當于1mgCO₂

3.  酚酞指示劑：1g酚酞溶于100ml 95％乙醇中，貯于滴瓶中。

主要設備

呼吸測定裝置、天平、鐘表、酸式及堿式滴定管、溫度計

實驗材料

發芽的小麥種子

實驗步驟

1. 取500ml廣口瓶一個，瓶口用打有三孔的橡皮塞塞緊，一孔插一盛堿石灰的干燥管，使呼吸過程中能進入無CO₂的空氣，一孔插溫度計，另一孔直徑約25px，供滴定用，平時用一小橡皮塞塞緊，瓶塞下面掛一鐵絲紗小籃，以便裝植物樣品，整個裝置即謂“廣口瓶呼吸測定裝置”。

2. 在瓶口準確加入約0.05mol/L 的Ba(OH)₂溶液20ml，立即塞緊橡皮塞（不帶小籃），充分搖動廣口瓶2min，待瓶內CO₂全部被吸收后，拔出小橡皮管塞，加入酚酞指示劑2滴，把滴定管插入孔中，用標準草酸溶液進行空白滴定，直到紅色剛剛消失為止。

3. 倒出廢液，用無CO₂的蒸餾水（煮沸過的）洗凈后，重加上述Ba（OH）₂溶液20ml，同時稱取植物樣品5～10g，裝入小籃子中，掛于橡皮塞下，塞緊瓶塞，開始記錄時間，經過20～30min，其間輕輕搖動數次，使溶液表面的BaCO₃薄膜破壞，有利于充分吸收CO₂。然后用草酸滴定，方法如前。（注意：防止口中呼出的氣體浸入瓶內！）

4. 結果計算

呼吸速率（mgCO₂/g(FW)/h）＝（A－B）×1/(W×t)

上式中，A：空白滴定用去的草酸量（ml）；B：樣品滴定用去的草酸量（ml）；W：樣品鮮重（g）；t：測定時間（h）。每毫升1／44mol/L 的草酸相當于1mgCO₂。