實時熒光定量PCR:在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
定量PCR儀是在普通PCR儀的基礎上加裝了熒光激發裝置和熒光檢測裝置,PCR擴增和檢測同時進行,最終結果不需進行電泳檢測,所以有效地避免了樣品間的交叉污染。常規 PCR技術:對PCR擴增反應的終點產物進行定量和定性分析,無法對起始模板準確定量,無法對擴增反應實時檢測。
實時定量PCR技術:利用熒光信號的變化實時檢測PCR擴增反應中每一個循環擴增產物量的變化,通過Ct值和標準曲線的分析對起始模板進行定量分析。熒光定量PCR儀就是通過對所記錄的參數來計算樣品的初始模板量的。