外周血白細胞HLAB27的表達

CD3 單抗 HLA-B27 單抗 全血

溶血劑 多聚甲醛

流式細胞儀

1. 取熒光素 PE 標記的 CD3 單抗及 FlTC 標記的 HLA-B27 單抗 30 μl、EDTAK₃ 抗凝的全血 50 μl，混勻后室溫染色 15 min ( 或 20 min)。

2. 加溶血劑 2 ml 溶解紅細胞（10 min）。

3. 1500 r/min 離心洗滌除去細胞碎片，加 1% 多聚甲醛固定 ( 15 min)。

4. 上機測定。在測完標準微球并調節好 Fl1 電壓后，不可改變 FL1 的設置。通過 CD3-PE/SSC 設“門”'圈定 CD3 陽性細胞（T 淋巴細胞），檢測其 B27 的平均熒光強度。如標本熒光強度小于標準微球熒光強度則為陰性，相反為陽性。

5. 給出流式細胞儀檢測結果并發出實驗報告。