基因治療“復活”小鼠聽力

　　來自邁阿密大學、哥倫比亞大學、加州大學舊金山研究所、巴斯德研究所、法國國家健康與醫學研究院、法國科學研究中心、法蘭西學院、巴黎大學和法國克萊蒙特?奧弗涅大學的科學家成功恢復了成年DFNB9耳聾小鼠模型的聽力。

　　DFNB9耳聾是一種常見的先天性遺傳性耳聾，因為缺乏編碼耳畸蛋白（otoferlin）的基因，患有DFNB9耳聾的人嚴重失聰。該蛋白是聽覺感覺細胞突觸傳遞聲音信息所必要的蛋白質。通過對成年DFNB9小鼠模型耳蝸內注射該基因，科學家成功地將聽覺突觸功能和聽覺閾值恢復到了接近正常水平，這項成果發表在PNAS雜志，為將來耳聾基因治療試驗開辟了新道路。

　　超過一半的非綜合征性重度先天性耳聾病例都有一些遺傳原因，其中大多數（80%）是常染色體隱性形耳聾（DFNB）所致。目前，人工耳蝸植入術是這些患者恢復聽力的唯一選擇。

　　腺相關病毒（AAVs）是人類治療性基因轉移技術最有前途的載體之一。基于AAVs的基因治療是耳聾患者的福音之一，但其應用限制較多。人類，內耳發育始于子宮，在懷孕大約20周左右胎兒就開始有聽力了。先天性耳聾的確診通常在新生兒時期。動物模型基因治療必須考慮到這一點，當聽覺系統已經形成后，再進行基因注射然后證明基因療法的有效性。換句話說，治療必須逆轉現有的耳聾。

　　項目領導者Saa?d Safieddine團隊嘗試采用了DFNB耳聾小鼠模型，這種耳聾約占人類先天性遺傳性耳聾病例的2%到8%。

　　盡管感覺上皮沒有缺陷，但突觸對聲音的刺激不能釋放神經遞質，缺乏耳畸蛋白的突變小鼠是極度失聰的。因此，這種小鼠是測試病毒基因療法有效性的適當模型。然而，AAVs的DNA包裝能力有限（約4.7kb），因此很難對編碼區（cDNA）超過5kb的基因使用這種技術，耳畸蛋白的編碼區有6kb。

　　科學家們采用了一種雙AAV策略。兩種不同的重組載體，一種含5’端，一種含3’端。耳畸蛋白編碼區域在成年突變小鼠體內重建，從而長期恢復內耳毛細胞中耳畸蛋白的表達，然后恢復聽力。

　　科學家初步證明，使用分別裝載著支離破碎cDNA的載體的概念可以用于生產耳畸蛋白，并能持久地糾正小鼠嚴重耳聾表型。

　　這意味著，DFNB9先天性耳聾患者局部基因治療的窗口期可能比想象的更寬，目前，該研究結果屬于一項ZL申請的一部分。