雙色同步成像在熒光共定位等成像實驗中的應用（三）

擴展閱讀：GCaMP鈣離子成像中，視網膜上兩個神經細胞表現出相反的鈣離子濃度變化（A濃度高的時候B濃度低，B濃度變高時A濃度下降），如何采用Reslice方法在平面圖中反映出這種關系，敬請參閱鏈接中文章第14-16步：點擊進入了解>> 

W-View GEMINI應用實例4——心肌細胞搏動時鈣離子濃度的變化與細胞收縮在時間上的先后分析

除了兩個不同顏色的熒光同步成像之外，W-View GEMINI還可以用于熒光和明場的同步成像。在這個例子中，研究者同步拍攝監測了心肌細胞波動時的鈣離子濃度變化以及細胞收縮的情況。藍光激發發綠色熒光的Fluo-8被用于鈣離子濃度的監測，而明場的相差（phase contrast）成像則是采用了600-680nm的紅光。通過對單個細胞中鈣離子濃度和相差圖像的分析，可以看出鈣離子的濃度上升是稍稍領先于心肌細胞的收縮的。

這一類實驗中，明場透射光的信號是比熒光信號強很多的，除了可以在明場透射光光路中加入減光片將兩個信號調整得差不多之外，更方便的方法是利用Flash 4.0 LT可以針對芯片兩半分別調整曝光時間的特點進行更加靈活的調整（參考本文相關段落：雙色同步成像——一臺Flash 4.0 LT相機作兩臺用）。

W-View GEMINI應用實例5——斑馬魚雙色雙光子lightsheet成像

在國內，北京大學的研究者也采用W-View GEMINI在他們自己設計搭建的雙色雙光子lightsheet成像系統中。系統采用兩臺飛秒激光器作為光源分別雙光子激發兩個顏色的熒光探針，進行雙色的3維lightsheet成像。樣品是3天大小的斑馬魚，紅色和綠色的熒光探針分別標記著紅細胞和胰島細胞，為了能夠盡可能縮短3維圖像的采集時間，以防紅細胞在血管中的移動影響成像質量，系統中采用了W-View GEMINI進行了雙色的分光，讓Flash 4.0 V2相機同步對紅細胞和胰島細胞進行成像。

http://v.youku.com/v_show/id_XMTI3NjQzMjA1Mg==.html

擴展閱讀：更多的資料可以參考其在濱松顯微成像大賽上的投稿。其獨特的高速三維lightsheet成像方法2P3A-DSLM的介紹可參考其已發表的論文。

更多雙色同步成像的文獻與應用實例

1. 單分子多色FRET，采用濱松Flash 4.0 & W-View GEMINI，通過cy3/cy5/cy7的組合分析核糖體與tRNA的相互作用：

Juette MF, et. al,?The bright future of single-molecule fluorescence imaging,?Curr Opin Chem Biol. 2014 Jun 20;20C:103-111.

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