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  • 發布時間:2020-07-13 23:09 原文鏈接: 原代細胞分離和培養基本步驟

    原代細胞分離和培養基本步驟

     

    1、器官和組織的選擇

    盡可能的去除不必要的組織和血跡。

     

    2、原代細胞的分離

    (1)應用PriCells原代細胞分離試劑盒I、II、III。

    (2)根據組織來源不同,可選用不同的PriCells原代細胞分離試劑盒。

     

    3、原代細胞的培養:

    (1)PriCells原代細胞特制培養基

    (2)PriCells原代細胞特制添加物

    (3)優質胎牛血清

     

    4、細胞的培養和鑒定:

    PriCells原代細胞鑒定試劑盒

     

    4、原代細胞的傳代、保存

    (1)傳代:依椐細胞的生長狀態,生長的細胞1:2或1:3進行傳代。

    (2)保存:DMSO+培養液+血清

    按下列順序降溫:室溫→4℃(20分鐘)→冰箱冷凍室(30分鐘)→超低溫冰箱(-80℃  過夜)→液氮。

     

    5、原代細胞的復蘇

    (1)取出細胞,迅速放入37℃溫水中快速解凍。

    (2)吸出細胞懸液,并加10倍以上培養液。

    (3)用培養液適當稀釋后接種培養瓶,放入37℃ CO2培養箱靜置培養。


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