單克隆抗體上清制備實驗——大量制備雜交瘤或細胞系

1. 同備擇方案 1 中大規模制備 MAb 上清的步驟 1～4，但等細胞長到合適的密度時就應收獲細胞，或者是在細胞生長的平臺期收獲。

2. 將細胞倒入無菌的 250 ml 錐形離心管中，于 4℃ 250 g 離心 15 min, 棄上清，置細胞沉淀于冰上。

3. 將 10 瓶細胞沉淀用 4℃ 的 PBS 250 ml 重懸，合并到一個試管中，4℃ 250 g 離心，棄上清。

4. 重復以上步驟，最終把細胞合并到一管中，細胞經過 3 次洗滌后，可以進一步加工 (如細胞裂解、放射性標記)。

估計所需細胞的數量，此過程將產生大約 10⁶ 細胞/ml，將細胞轉到數個 175 cm² 培養瓶中，以便制備所需數量的細胞（每個 175 cm² 培養瓶的培養物將加到 2.4 L 的培養液中）。通過肉眼觀察培養液的顏色和混濁度，并通過每天選幾瓶細胞進行細胞計數及檢測細胞活力等方法來估計收獲的時間。勿使細胞過度生長，否則細胞活力將急劇地下降。