分光光度法測定山梨酸（鉀）含量

1、測定原理

提取樣品中山梨酸及其鹽類,經硫酸重鉻酸鉀氧化成丙二醛,再與硫代巴比妥酸形成紅色化合物,其顏色深淺與丙二醛含量成正比,可于530nm處比色定量。

2、試劑

(1)重鉻酸鉀硫-硫酸溶液:0.1mol/L重鉻酸鉀與0.15mol/L硫酸以1:1混合備用。

(2)硫代巴比妥酸溶液:準確稱取0.5g硫代巴比妥酸于100mL容量瓶中,加20mL水,加10mL1mol/L氫氧化鈉溶液,搖勻溶解后再加1mol/L鹽酸11mL,以水定容(臨時用配制,6h內使用)。

(3)山梨酸鉀標準溶液:準確稱取250g山梨酸鉀于250mL容量瓶中,用蒸餾水溶解并定容(本溶液山梨酸含量為1mg/mL,使用時再稀釋為0.1mg/mL)。

3、儀器

分光光度計;組織碎機;10mL比色管。

4、操作方法

(1)樣品處理    稱取100g樣品,加200mL水于組織搗碎機中搗成勻漿。稱取勻漿100g,加水200mL繼續搗1min,稱取10g于20mL容量瓶中定容,搖勻,過濾備用。

(2)標準曲線繪制    吸取0.0mL、2.0mL、4.0mL、6.0mL,8.0mL、10.0mL山梨酸鉀標準溶液于250mL容量瓶中,用水定容。分別吸取2.0mL于相應的10mL比色管中,加2mL重鉻酸鉀硫酸溶液,于100℃水浴中加熱7min,立即加入2.0mL硫代巴比妥酸,繼續加熱10min,立刻用冷水冷卻,于530nm處測吸光度,繪制標準曲線。

(3)試樣測定    吸取式樣處理液2mL于10mL比色管中,按標準曲線繪制操作,于530nm處測吸光度,以標準曲線定量。

5、結果計算

式中    X₁——山梨酸鉀含量,g/kg;

           X₂——山梨酸含量,g/kg;

           c——試液中含山梨酸鉀的濃度,mg/mL;

           m——稱取勻漿相當于試樣質量,g;

           1.34——山梨酸與山梨酸鉀之間的換算系數;

           250——樣品處理液總體積,mL;

           2——用于比色時試樣溶液的體積,mL。