關于黃曲霉的檢測—免疫親和柱熒光分光光度法和免疫親和術hplc法

　　免疫親和柱法和酶聯免疫吸附法雖然都可達到速簡便效果，但酶聯免疫吸附法僅能檢測單一毒素（如黃曲霉毒素b1）含量，而且易出現假陽性結果，難以控制。免疫親和柱法（包括熒光光度法和hplc法）卻能達到既定量準確又快速簡便的要求。

　　免疫親和柱的使用可以避免傳統tlc和hplc的缺點，同時免疫親和柱與tlc和hplc法結合可以大大提高工作效率，提高靈敏度和準確度。

　　黃曲霉毒素免疫親和柱-熒光光度計法是以單克隆免疫親和柱為分離手段，用熒光計，紫外燈作為檢測工具的快速分析方法。它克服了tlc和hplc法在操作過程中使用劇毒的真菌毒素作為標定標準物和在樣品預處理過程中使用多種有毒，異味的有機溶劑，毒害操作人員和污染環境的缺點。同時黃曲霉毒素免疫親和柱-熒光光度計法分析速度快，一個樣品只需10-15min,比傳統方法快幾個小時甚至幾天時間；儀器設備輕便容易攜帶，自動化程度高，操作簡單，直接讀出測試結果，可以在小型實驗或現場使用。可以進行黃曲霉毒素總量 (b1b2g1g2) 的測定，檢測限可達到1ug/kg,達到黃曲霉毒素標準限量值以下測定范圍為1-300ug/kg。

　　黃曲霉毒素免疫親和柱-高效液相色譜法比傳統的hplc法更加安全，可靠，靈敏度和準確度高。它采用單克隆抗體免疫技術，可以特效性地將黃曲霉毒素或其他真菌毒素分離出來，分離效率和回收率高。

　　分析原理試樣中的黃曲霉毒素用一定比例的甲醇/水提取液經過過濾，稀釋后，用免疫親和柱凈化，以甲醇將親和柱上的黃曲霉毒素淋洗下來，在淋洗液中加入溴溶液衍生，以提高測定靈敏度，然后用熒光分光光度計進行定量。也可以將甲醇-黃曲霉毒素淋洗液的一部分注入hplc中，對黃曲霉毒素b1,b2,g1,b2分別進行定量分析。免疫親和柱是用大劑量的黃曲霉毒素單克隆抗體固化在水不溶性的載體上，然后裝柱而成。該方法的測定范圍0-300ug/kg。