本法是以NaIO4先將HRP表面的糖分子氧化成醛基，然后再與Ig上的氨基相結合，所獲酶標記抗體的產率高，將近70%的HRP和Ig結合，99%的Ig與酶結合，酶與Ig的活性無重大損失，是最常用的方法。
原理
經典的過碘酸鈉法中需采用二硝基氟苯封閉HRP上殘留的α-和ε氨基基以避免酶分子之間的交聯。后來Wilson等改用在低PH下使NaIO4氧化HRP，從而省去了二硝基氟苯封閉HRP步驟。HRP經NaIO4氧化后形成的醛化酶可與抗體分子的氨基相連，形成斯夫氏堿，后者可進一步用NaBH4(或乙醇胺)還原生成穩定的酶標記抗體。
標記步驟
(1)稱取5mgHRP溶解于1ml蒸餾水中。
(2)于上液中加入0.2ml新配的0.1M NaIO4溶液，室溫下避光攪拌20分鐘。
(3)將上述溶液裝入透析袋中，對1mM PH4.4的醋酸鈉緩沖液透析，4℃過夜。
(4)加20μl 0.2M PH9.5碳酸鹽緩沖液，使以上醛化桯RP的PH升高到9.0～9.5，然后立即加入10mg IgG(抗體，或SPA5mg)在1ml 0.01M碳酸鹽緩沖液中，室溫避光輕輕攪拌2小時。
(5)加0.1ml新配的4mg/ml NaBH4液，混勻，再置4℃2小時。
(6)將上述液裝入透析袋中，對0.15M PH7.4 PBS透析，4℃過夜。
其余步驟(純化)同戊二醛標記步驟的(6)、(7)、(8)。
結果判定
除標記物IgG量的計算，略有不同以外，其余均同戊二醛法。
IgG量(mg/ml)=(OD280nm-OD403nm×0.3)×0.62
試劑及器材
(1)0.1M NaIO4：稱取214mg高碘酸鈉(廣州化學試劑廠，批號830602)溶于蒸餾水10ml中。
(2)1mM PH4.4醋酸鈉緩沖液:
0.2M NaAc (1.361克/50ml) 3.7ml
0.2M HAc (0.601ml/50ml) 6.3ml
加蒸餾水至2,000ml。
(3)0.2M PH9.5碳酸鹽緩沖液:
Na2CO3 0.32克
NaHCO3 0.586克
加蒸餾水至50ml
再用蒸餾水作20倍稀釋，即成0.01M PH9.5的碳酸鹽緩沖液。
(4)NaBH4溶液(4mg/ml):
臨用時稱取NaBH44mg溶于1ml蒸餾水中。
(5)其它的試劑及器材可參見戊二醛標記法。