外源的DNA克隆到插入型的λ載體分子上，會使噬菌體的某種生物功能喪失效力，即所謂的插入失活效應。插入型的λ載體又可以分為免疫功能失活的（inactivatiortofimmunityfunction）和大腸桿菌β-半乳糖苷酶失活的（inactlvatlonofE．coliβ-galactosidase）兩種亞型。
①免疫功能失活的插入型載體：在這類插入型載體的基因組中有一段免疫區，其中帶有一兩種核酸內切限制酶的單切割位點。當外源DNA片段插入到這種位點上時，就會使載體所具有的合成活性阻遏物的功能遭受破壞，而不能進入溶源周期。因此，凡帶有外源DNA插入的λ重組體都只能形成清晰的噬菌斑，而沒有外源DNA插入的親本噬菌體就會形成混濁的噬菌斑。
②β-半乳糖苷酶失活的插入型載體：它們的基因組中含有一個大腸桿菌的lac5區段，其中編碼著β半乳糖著酶基因lacZ。由這種載體感染的大腸桿菌lac-指示菌，涂布在補加有IPTG和Xgal的培養基平板上，會形成藍色的噬菌斑。如果外源DNA插入到lac5區段上，阻斷了β-半乳糖著酶基因lacZ的編碼序列，不能合成β-半乳糖昔酶，只能形成無色的噬菌斑。